Tematyka badań
- Biologia komórek macierzystych – mechanizmy reprogramowania i różnicowania:
- Mechanizmy różnicowania indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych do kardiomiocytów, komórek śródbłonka i mięśni szkieletowych;
- Mechanizmy różnicowania komórek satelitarnych mięśni szkieletowych;
- Mechanizmy różnicowania krwiotwórczych komórek macierzystych: rola niszy hematopoetycznej w starzeniu się układu krwiotwórczego i rozwoju białaczek.
- Metody mobilizacji komórek hematopoetycznych
- Molekularne mechanizmy dystrofii mięśniowej Duchenne’a – rola oksygenazy hemowej-1, Nrf2 oraz mikroRNA w różnicowaniu komórek satelitarnych, regeneracji i unaczynienia mięśni szkieletowych i serca.
- Biologia naczyniowa: molekularne mechanizmy angiogenezy i wpływ metabolizmu hemu w na funkcjonowanie komórek śródbłonka.
- Mechanizmy uszkodzenia i regeneracji mięśnia sercowego: rola oksygenazy hemowej-1
- Biotechnologia medyczna: inżynieria genetyczna, terapia genowa i terapia komórkowa w modulacji neowaskularyzacji i zapalenia oraz regeneracji mięśnia sercowego po zawale.
- Biologia nowotworów: rola niedotlenienia i oksygenazy hemowej–1 w inicjacji, wzroście, przerzutowaniu i oporności na terapie.
- Terapie przeciwnowotworowe.
- Rola mikroRNA w biologii naczyniowej, chorobach nerek i biologii nowotworów.
- Rola niedotlenienia, genów antyoksydacyjnych i mikroRNA w regulacji ekspresji genów.
- Mechanizmy starzenia naczyń krwionośnych i senescencji komórkowej - rola czynnika transkrypcyjnego Nrf2, Keap1 i miR34-a.
- Rola fagocytów w pozawałowej przebudowie i niewydolności mięśnia sercowego.
- Wpływ procesów naprawy i metylacji DNA na efektywność ekspresji transgenu z wektorów AAV.
Wybrane techniki
- Cytometria przepływowa i sortowanie komórek.
- Obrazowanie molekularne in vivo (Vevo 2100, IVIS© Lumina II Laser Doppler).
- Laserowa metoda mikrodysekcji.
- Wyciszanie ekspresji genów poprzez CRISPR/Cas oraz shRNA.
- Techniki siRNA i mikroRNA.
- Angiogenne testy in vitro: tworzenie tubul na matriżelu, test aortalny, test sferoidalny.
- Modele in vivo: niedokrwienie kończyny tylnej, gojenie ran, modele indukcji nowotworów, chemiczna kancerogeneza, model zawału mięśnia sercowego u myszy.
- Technologia indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych (iPSC).
- Klonowanie, produkcja wektorów plazmidowych i wirusowych: retrowirusowych, lentiwirusowych, adenowirusowych, AAV.
- Regulacja ekspresji genów w wektorach plazmidowych: system regulowany przez niedotlenienie i zależny od tetracykliny, uzyskiwanie stabilnie transfekowanych linii komórkowych.
- Izolacja i hodowla komórek: pierwotnych komórek satelitarnych, hematopoetycznych i mezenchymalnych komórek zrębowych, komórek śródbłonka, proksymalnych komórek nabłonka nerek.
Modele zwierzęce, utrzymywane w nowoczesnej zwierzętarni (SPF - ang. Specific pathogen free)
- Myszy pozbawione miR-146a (nokaut miR146a);
- Myszy pozbawione miR-378a (nokaut miR378a);
- Myszy mdx (nokaut dystrofiny);
- Myszy pozbawione HO-1 (nokaut HO-1);
- Myszy HO-1-knockout GFP;
- Myszy HO-1-floxed (knock out & knock in);
- Myszy pozbawione aktywności transkrypcyjnej Nrf2 (nokaut transkrypcyjny Nrf2);
- Myszy cukrzycowe (szczep db/db);
- Myszy z komórkowo-specyficzną ekspresją rekombinazy Cre (Cdh5-Cre, Cdh5-CreER, Hoxb5-CreER);
- Myszy NSG-SGM3;
- Myszy Hoxb5-mCherry;
- Myszy Neo1-floxed;
- Myszy Nrf2-floxed;
- Myszy miR-34a-floxed.